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第3章 案例二MS培养基母液的配制和保存

一、MS基本培养基母液的配制

按所示数据分别配制:

1.大量元素母液

2.微量元素母液

3.铁盐母液

4.除蔗糖之外的有机物质贮备液

在制备这四种母液的时候,应将称量出来的各种成分分别放入烧杯中,加少量蒸馏水使之溶解,然后再依次混合,以蒸馏水定容。对于铁盐母液来说,在定容之后须将其装入棕色细口瓶中,盖严瓶塞,用力振荡1min~2min,以防在保存过程中沉淀。

二、生长调节物质母液的配制

各种生长调节物质的母液应当分别配制。如果它们是不溶于水的,则应先把它们溶解在很少量的适当溶剂中,然后再加蒸馏水到最终容积。生长调节物质母液的质量浓度取决于所要求的生长调节物质的水平,其母液的浓度可以是0.1mg/mL~1.0mg/mL。生长素类物质(如IAA、NAA、2,4-D等)需要先用少量95%酒精或1mol/LNaOH加热助溶后,再加水定容。细胞分裂素类物质(如KT、BAP等)需要先溶于少量1mol/L盐酸中,再加水定容。叶酸需用少量稀氨水溶解。

三、母液的保存

上述各种母液都应装在适当的玻璃瓶或塑料瓶中,贴上标签,注明母液的名称、浓缩倍数或配制1L培养基的需用量、配制日期等,然后置冰箱中保存。在制备椰子汁(液体胚乳)的时候,要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质,过滤,然后置塑料瓶中贮存于-20℃的低温冰箱内。

经过保存的母液在每次使用之前必须轻轻摇动瓶子,如果发现其中有沉淀、悬浮物或微生物污染,必须立即将其淘汰。

【思考题】

1.铁盐溶液配制方法是什么?

2.母液保存过程中有什么注意事项?

3.生长素类物质和细胞分裂素类物质的配制方法分别是什么?