一、目的与要求
1.熟悉不同规格、不同用途的玻璃或塑料器皿应采用不同清洗方法。
2.能够按照要求清洗各类玻璃或塑料器皿。
二、原理
在生物学实验中所使用的玻璃和塑料器皿清洁与否,直接影响实验数据的质量,往往由于器皿的不清洁或被污染而导致较大的实验误差,甚至会出现相反的实验结果,导致实验的失败。
植物组织培养最基本的要求是各操作都应从无毒害、无污染的培养环境来考虑。培养过程中最经常最大量的工作之一,就是洗涤培养容器和其他常用器皿。植物组织培养中对培养容器及玻璃器皿的清洁程度要求较高,要求将有机物、油脂等污染除掉。
三、操作步骤
1.新购入的器皿只有在彻底清洗后才能使用,一般用1%左右浓度的稀盐酸将可溶性无机物除去,也可用洗涤剂洗涤。(较常用的洗涤剂是洗衣粉及肥皂,备一点去污粉也有用处。)
2.一般器皿的洗涤可用洗衣粉水溶液或加热的洗衣粉水溶液浸泡洗涤,用自来水冲洗干净后,再用蒸馏水冲洗后备用。
3.生产用的培养容器可免去蒸馏水冲洗过程。对于吸管等难洗涤的用具可以在洗液中(重铬酸钾和浓硫酸混合液)浸泡后再洗。
洗液的配制方法:称40g工业用重铬酸钾加入100mL水中,加热溶化,待冷却后再慢慢往上述溶液中加入工业用浓硫酸800mL,边加边搅拌,配好后贮存在瓷缸或玻璃缸中,加盖备用。
培养容器及玻璃器皿在使用后,须立即浸入清水中浸泡,以防脏物和蛋白质类物质干结后黏附在玻璃壁上。在清水中泡一段时间后,先初步涮去瓶内污物,泡入浓洗衣粉水中,再用瓶刷刷洗,瓶外也要刷到。刷后放到水龙头下用流水冲洗4次~5次。
移液管之类的仪器,可用橡皮及球(洗耳球)和热洗衣粉水吸洗,再用流水冲洗,垂直晾干或烘干。洗好的瓶口应透明澄亮,内外玻璃表面上水膜均匀,不挂水珠,置搁架上沥水晾干,急用的器皿可以用烘箱快速烘干。
如果用过的玻璃器皿在管壁上或瓶壁上粘着琼脂,最好用热水洗涤,或将它们置于高压灭菌锅中稍加热,这样容易洗刷干净。
即使带有污染物的培养容器是一次性消耗品,在把它们丢弃之前也应该行进行高压蒸汽灭菌,以尽量降低细菌和真菌在实验室中扩散的机率,减少污染源。将洗干净的器皿置于烘箱内在大约75℃下干燥,或在常温下晾干后,贮存于防尘橱中,在进行加热干燥或常温晾干时,各种玻璃容器如三角瓶和烧杯等都应口朝下,以便使里面的水能很快流尽。
【作业】
1.写出最常用的150mL玻璃三角瓶的完整清洗过程,采用什么洗涤液?如何配制?
2.用洗涤液清洗玻璃三角瓶应注意哪些事项?