大花萱草为百合科萱草属多年生草本植物。
原产于我国中南部,欧美各国已培育出许多四倍体品种,花大色艳,用于园林美化,有较高观赏价值。大花萱草一般多采用分株繁殖,速度很慢,不能在短期内获得大量小苗,因而采用组织培养方法能快速繁殖。
一、选材与消毒
取花茎和子房在自来水下冲洗干净,用0.1%氯化汞溶液消毒8min,用无菌水冲洗4次~5次,在无菌条件下,将外植体切成5mm的小块接种。
二、初代培养
将外植体接种于MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L+2,4-D0.5mg/L的培养基上,培养温度22℃~24℃,光照强度120μmol·m-2·s-1,每天光照12h。2周~3周后,诱导形成愈伤组织。
三、继代培养与育苗
将愈伤组织切成0.5cm见方的小块转移到MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L培养基上,培养4周后,可从愈伤组织上分化出细小的丛芽。将丛芽进一步切割接到上述新鲜培养基上,继代增殖,每4周增殖1次。获得大量的分化苗后,将2cm~3cm高、较粗壮的芽苗切下,转移到MS+NAA0.1mg/L培养基上,2周~3周后,可诱导出粗壮的不定根。
四、试管苗移栽与管理技术
移栽前,打开瓶盖炼苗2d~3d,取出苗后,用清水洗净根部附着的培养基,移栽于消过毒的草炭与蛭石(1∶1)的混合基质中,浇透水,保持温度20℃~22℃,湿度85%以上,注意通风与遮阴,移栽成活率可达90%以上。
【思考题】
1.大花萱草组培中外植体取材部位是什么?
2.大花萱草组培中外植体诱导成苗方式是什么?
3.大花萱草组培生根苗炼苗规格是什么?