书城自然科学植物组培快繁技术案例与实训
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第37章 案例三十六马蹄莲组织培养技术

马蹄莲为天南星科马蹄莲属植物,是多年生草本植物。原产于南非,喜温暖、湿润、荫蔽,不耐寒,忌干旱,是一种较为名贵的切花,亦可盆栽观赏,花期较长。马蹄莲常规繁殖方法可用分球和种子播种,组织培养可用小球茎和叶片等作外植体。

一、选材与消毒

取马蹄莲侧生小球茎,在自来水下冲洗干净,用70%酒精消毒30s,再用0.1%氯化汞溶液消毒7min~10min,然后用无菌水冲洗4次~6次,在超净工作台上用解剖刀将球茎横切成3mm厚的圆片作接种用。

二、初代培养

用镊子把球茎圆切片平放于MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L培养基上,培养温度25℃,光照强度120μmol·m-2·s-1~160μmol·m-2·s-1,每天光照12h。接种5d后,外植体出现膨大,切口颜色由白色逐渐变为淡黄绿色;10d后,周边出现绿色芽点;20d后,从切口中心及外围长出绿色的芽苗;30d后,伸长的芽苗高度可达1.5cm~2.0cm。

三、继代培养与生根

将初代培养分化出的芽苗,从基部切下,转入培养基MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L中进行继代增殖。芽苗迅速生长,15d后可达3.0cm,且基部有白色根原基出现。然后将高度3.0cm~3.5cm的芽苗转入生根培养基1/2MS+NAA0.3mg/L+IBA0.1mg/L中,20d后,陆续长出白色的根。

四、试管苗移栽

当试管苗单株根数量2条~3条,长度0.4cm~0.5cm后开始炼苗。7d后移栽于消过毒的草炭与蛭石(2∶1)的混合基质中,浇透水,保持温度22℃~24℃,湿度85%以上,注意通风与遮阴,移栽成活率可达90%以上。

【思考题】

1.马蹄莲组培中外植体如何取材?

2.马蹄莲组培增殖方式是什么?

用该正交表进行试验需要做4次试验,最多可安排3个试验因素,每个试验因素可设置2个水平。各试验号所对应的各列水平数表示该试验号实施时各试验因素应取的实际处理数值。正交表主体部分的数字表示各因素所取的水平数,表的列号表示各试验因素的序号。